曲古菌素A对食管癌EC9706细胞B淋巴细胞瘤-2、DNA连接酶4、共济失调毛细血管扩张突变基因表达影响

目的通过检测曲古菌素A(TSA)对食管癌细胞EC9706的B淋巴细胞瘤-2、DNA连接酶4、共济失调毛细血管扩张突变基因(atm)表达以及细胞增殖的影响,为进一步探讨TSA的辐射增敏机理提供依据。方法采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测TSA对EC9706增殖的影响;实时荧光定量聚合酶链反应技术检测TSA处理与未处理的EC9706细胞的B淋巴细胞瘤-2、DNA连接酶4、atm的mRNA水平。结果一定浓度的TSA可显著抑制食管癌细胞EC9706的增殖,且癌细胞的相对存活率与TSA的浓度呈线性相关(P<0.05)。TSA同时下调了EC9706细胞的B淋巴细胞瘤-2、DNA连接酶4、atm 3个基因的mRNA水平。结论一定浓度的TSA在体外能显著影响基因B淋巴细胞瘤-2、DNA连接酶4和atm在EC9706细胞中的mRNA表达,可有效抑制食管癌细胞的增殖。     

HPLC法同时测定新会柑种子中7种成分

目的建立HPLC法同时测定新会柑Citrus reticulata‘Chachi’种子中辛弗林、没食子酸、橙皮苷、柠檬苦素、川陈皮素、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮、橘皮素的含有量。方法新会柑种子甲醇提取物的分析采用DIKMA Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相磷酸水-(甲醇∶乙腈=1∶1),梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长辛弗林(224 nm),没食子酸(218 nm),橙皮苷(283 nm),柠檬苦素(209 nm),川陈皮素、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮、橘皮素(330 nm)。结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(R~2≥0.999 1),平均加样回收率98.546%～101.769%, RSD 1.3%～2.6%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于新会柑种子的质量控制。     

老年冠心病患者外周血微小RNA-221表达水平及其临床意义

目的探讨老年冠心病患者外周血微小RNA-221 (miR-221)的表达水平及其临床意义。方法采用qRT-PCR和电化学发光法分别测定老年冠心病患者85例(冠心病组)和老年健康体检者45例(对照组)外周血中miR-221表达水平和N末端B型钠尿肽前体(N-terminal pro-B-type natriuretic peptide,NT-proBNP)水平。通过超声心动图检查测定LVEF。结果 2组年龄、性别、体质量指数、白蛋白、血红蛋白比较,差异无统计学意义(P 0.05)。与对照组比较,冠心病组尿素、肌酐、C反应蛋白(CRP)、miR-221及NT-proBNP水平明显升高,LVEF明显降低,差异有统计学意义(P 0. 05,P 0. 01)。冠心病组心功能Ⅳ患者的miR-221及NT-proBNP水平最高,Ⅲ级、Ⅱ级、Ⅰ级依次降低,Ⅰ级患者LVEF最高,Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级依次降低,差异有统计学意义(P 0. 05,P 0. 01)。Spearman相关性分析显示,miR-221与尿素、肌酐、CRP、NT-proBNP及心功能分级呈正相关,与白蛋白及LVEF呈负相关(P 0. 05,P 0. 01)。NT-proBNP与年龄、尿素、肌酐、CRP、心功能分级呈正相关,与体质量指数、白蛋白、血红蛋白及LVEF呈负相关(P 0. 05,P 0. 01)。miR-221、NT-proBNP的ROC曲线下的面积分别为0. 735(95%CI:0. 607～0. 864),0. 971(95%CI:0. 940～1. 000),两者差异有统计学意义(P 0. 01)。miR-221诊断冠心病患者心力衰竭的敏感性为40. 6%,特异性为90. 5%。NT-proBNP诊断冠心病患者心力衰竭的敏感性为90. 6%,特异性为95. 2%。结论老年冠心病患者外周血miR-221表达水平明显升高,有助于冠心病患者心力衰竭诊断及预后判断。     

口服营养补充肠内营养混悬液对认知衰弱患者的影响

目的研究口服营养补充(ONS)肠内营养混悬液对认知衰弱(CF)患者的营养、衰弱表型及认知功能的影响。方法将60例CF患者随机分为ONS组(肠内营养混悬液)和对照组,每组30例。分别于基线、干预3和6个月测定营养指标、简易营养评估(MNA)评分、Fried衰弱表型评分、蒙特利尔认知评定量表(MoCA)评分等。结果 3个月时,ONS组白蛋白、前白蛋白、淋巴细胞计数、MNA评分高于对照组,差异有统计学意义(P0.01);6个月时,ONS组白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、淋巴细胞计数、MNA评分均高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。ONS组3和6个月的白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、淋巴细胞计数、MNA评分较基线均增高,差异有统计学意义(P0.01)。对照组3个月白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白较基线均升高(P0.05,P0.01)。ONS组3和6个月Fried衰弱表型评分明显低于对照组[(1.90±0.55)分vs(3.96±0.69)分;(1.00±0.26)分vs(4.03±0.67)分,P0.01],MoCA评分高于对照组(23.13±1.97)分vs(21.01±1.73)分;(27.12±1.61)分vs(20.19±3.19)分,P0.01);ONS组3和6个月Fried衰弱表型评分较基线下降、MoCA评分较基线升高(P0.01)。结论 ONS肠内营养混悬液可改善CF患者的营养、衰弱表型及轻度认知障碍。     

多柔比星介导的血管损伤促进主动脉夹层发生发展的机制研究

目的探讨多柔比星(Dox)介导的血管损伤在促进主动脉夹层(AD)发生发展中的作用机制。方法选取武汉大学人民医院行胸AD全弓置换患者10例为实验组,同期选择心脏移植术患者3例为对照组,2组均于术中取AD血管标本。另取3周龄雄性C57BL/6J野生型小鼠18只,随机分为3组,每组6只,对照组(WT组)、β氨基丙腈酯(BAPN)组(第3周开始饲喂含0.25%BAPN小鼠维持饲料)、BAPN+Dox组(根据体质量每周腹腔注射3mg/kg Dox,连续5周,第3周开始饲喂饲料同BAPN组),5周后,游离小鼠主动脉,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片。免疫组织化学及Western blot检测组织P53蛋白表达,TUNEL染色检测细胞凋亡情况。结果实验组P53蛋白较对照组明显升高(0.76±0.05 vs 0.39±0.11),凋亡细胞明显增多[(38.3±8.7)%vs (12.6±1.2)%](P0.01)。BAPN+Dox组死亡率明显高于BAPN组(100.0%vs 66.7%);BAPN+Dox组组织P53蛋白较BAPN组显著升高;VSMC凋亡明显增多,且2组P53蛋白和血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡均较WT组明显升高(P0.01)。结论 Dox介导的血管损伤可能通过诱导VSMC凋亡,促进AD发生发展。     

胸腺嘧啶脱氧核糖核酸糖基化酶的研究现状及进展

胸腺嘧啶脱氧核糖核酸糖基化酶(thymine DNA glycosylase，TDG)属于单功能尿嘧啶脱氧核糖核酸糖基化酶(uracil DNA glycosidase，UDG)超家族中的成员，在基因组稳定和表观遗传调控中具有双重作用。TDG参与调控DNA甲基化(DNA methylation)和去甲基化(DNA demethylation)。DNA甲基化主要为胞嘧啶(cytosine，C)甲基化，是指胞嘧啶以S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl Methionine，SAM)为甲基供体，在DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase，DNMTs)的作用下，在胞嘧啶第5位碳原子上加上一个甲基，形成5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine，5mC)。5mC广泛存在于哺乳动物基因组中，并在基因组稳定性维持、组织特异性基因沉默、逆转录转座子沉默等诸多生物学过程中发挥重要作用。DNA去甲基化是指5mC还原为C，这个过程也是由DNMTs完成的。DNA去甲基化包括被动去甲基化和主动去甲基化2种途径。被动DNA去甲基化是指在DNA复制过程中，新合成的子链DNA未能维持甲基化状态，导致DNA甲基化的被动稀释(passive dilution)；DNA主动去甲基化过程不涉及DNA复制，是指通过TDG等酶的作用去除5mC和5-羧基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine，5hmC)的氧化产物，即5-甲羟基胞嘧啶(5-formylcytosine，5fC)和5-羧基胞嘧啶(5-carboxylcytosine，5caC)。TDG还通过碱基切除修复途径(base excision repair，BER)切割糖与靶碱之间的N-糖苷键，在纠正错配及损伤的DNA碱基对(base pair，bp)中起重要作用。最近的研究表明TDG还在转录调控、胚胎发育及肿瘤治疗等领域发挥重要作用。本文总结了近年来TDG的研究现状及进展，为进一步的深入研究提供理论支持。      

杞菊地黄丸联合直流电离子导入香丹注射液治疗围绝经期干眼的临床观察

目的观察杞菊地黄丸联合直流电离子导入香丹注射液治疗围绝经期干眼的临床疗效。方法将80例(160眼)患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组各40例,对照组给予玻璃酸钠滴眼液治疗;治疗组在对照组的基础上加用杞菊地黄丸联合直流电离子导入香丹注射液治疗,共治疗30天,观察两组患者泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌量(SⅠT)、角膜荧光素染色(FL)及眼表疾病指数(OSDI)量表评分、主观症状评分和整体症状评分的变化。结果两组主观症状和整体症状评分较治疗前均有改善(P0.01);且治疗组较对照组改善更为明显(P0.05),OSDI评分治疗组降低明显低于对照组(P0.01)。治疗组较对照组BUT、SⅠT明显延长(P0.05)。结论杞菊地黄丸联合直流电离子导入香丹注射液治疗围绝经期干眼可有效延长BUT,促进泪液分泌,促进角膜上皮修复及减轻主观症状。     

表观遗传调控与青光眼发病机制研究进展

表观遗传学主要机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰和miRNAs等。这些机制将环境与基因相联系，在基因的特异性表达过程中发挥重要作用，影响疾病的表型。青光眼是全球第一大不可逆致盲眼病，其发病机制复杂，受遗传和环境的共同影响。本文分别对DNA甲基化、组蛋白修饰和miRNAs参与青光眼发病的机制进行综述，以期为临床诊治提供参考。